簡要描述:
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測試盒是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1052
商品詳情:
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測試盒測定意義:
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3479 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3479-1 | 25管/24樣 | 可見分光光度法 |
YSH3479-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇,同時(shí)還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412nm吸光度增加速率,來計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
心肌肌動(dòng)蛋白α1ELISA試劑盒 ACTC1免費(fèi)代測試劑
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小異二聚體伴侶ELISA試劑盒 SHP免費(fèi)代測試劑
小亞基鈣1ELISA試劑盒 CAPNS1免費(fèi)代測試劑
小細(xì)胞蛋白γELISA試劑盒 PARVγ免費(fèi)代測試劑
小細(xì)胞蛋白βELISA試劑盒 PARVβ免費(fèi)代測試劑
小細(xì)胞蛋白αELISA試劑盒 PARVα免費(fèi)代測試劑
小腦肽4ELISA試劑盒 CBLN4免費(fèi)代測試劑
小腦肽3ELISA試劑盒 CBLN3免費(fèi)代測試劑
小腦肽2ELISA試劑盒 CBLN2免費(fèi)代測試劑
小腦肽1ELISA試劑盒 CBLN1免費(fèi)代測試劑
小核糖核蛋白多肽CELISA試劑盒 SNRPC免費(fèi)代測試劑
小根蛋白ELISA試劑盒 ROLT免費(fèi)代測試劑
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γ/糖化酶比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣